PCR实验室压力梯度要求

 新天普资讯     |      2021-11-30


扩增检验实验室原则上分为四个单独的工作区域:

试剂贮存和准备区、标本制备区、扩增反应混合物配制和扩增区、扩增产物分析区。为避免交叉污染,进入各个工作区域必须严格遵循单一方向进行。

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试剂准备区→样品制备区 扩增区   产物分析区

 

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各实验区之间的试剂及样品传递应通过传递窗进行。

 

Reagent preparation area/试剂准备区

该实验区主要进行的操作为贮存试剂的制备试剂的分装和主反应混合液的制备。试剂和用于品制作的材料应直接运送至该区不得经过其他区域。试剂原材料必须贮存在本区内并在本区内制备成所需的贮存试剂。对与气流压力的控制,本区并没有严格的要求。

 

Sample preparation area/标品制备区

该区域主 要进行的操作为样本的保存、核酸(RNA、DNA)提取、贮存及其加入至扩增反应管和测定DNA的合成。

本区的压力梯度要求为:相对于邻近区域为正压,以避免从邻近区进入本区的气溶胶污染。另外,由于在加样操

作中可能会发生气溶胶所致的污染,所以应避免在本区内不必要的走动。

 

Amplification area/扩增区

该区域主要进行的操作为DNA扩增。此外,已制备的DNA模板(来自样本制备区)的加入和主反应混合液(来自试剂贮存和制备区)制备成反应混合液等也可在本区内进行。

本区的压力梯度要求为:相对于邻近区域为负压,以避免气溶胶从本区漏出。为避免气溶胶所致的污染,应尽量

减少在本区内的不必要的走动。个别操作如加样等应在超净台内进行。

 

Product analysis area/产物分析区

该区域主要进行的操作为扩增片段的测定。

本区是最主要的扩增产物污染来源, 因此对本区的压力梯度的要求为: 相对于邻近区域为负压,以避免扩增产物

从本区扩散至其它区域。

 

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